地区：上海市 宝山区
关键词：河北医科大学
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000004114
成果描述：
| 手术、化疗和放疗是肿瘤的主要治疗方法，但是都存在着一定的局限性，所以，研究理想的肿瘤治疗方法和手段是肿瘤治疗亟待解决的问题。肿瘤的生物治疗以其作用明显、副作用小而被医患双方所重视，其中，细胞因子基因治疗是生物治疗中研究最为深刻的一种策略。课题研究通过明确了插入IL-17基因后4T1细胞的体内外生长特性；明确了IL-17对荷4T1细胞移植瘤小鼠具有抑制肿瘤生长的作用；明确了IL-17在体内外抗肿瘤作用的机制。构建了小鼠IL-17真核表达载体，采用酶切鉴定、RT-PCR、瞬时转染COS-7细胞并检测mIL-17的蛋白表达确证mIL-17的真核表达质粒构建成功。然后大量抽提pcDNA3.1/mIL-17质粒和pcDNA3.1空质粒，脂质体介导转染4T1细胞，G418筛选出阳性克隆，最终获得转入pcDNA3.1/mIL-17或pcDNA3.1的4T1细胞。用光学显微镜观察4T1/IL-17、4T1/pcDNA3.1和4T1细胞的形态变化，RT-PCR检测IL-17基因的表达，激光共聚焦和Western-blot法检测IL-17蛋白的表达。细胞增殖实验MTS法分析4T1/IL-17细胞体外增殖反应，绘制生长曲线。流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率的变化以及细胞表面MHCI、MHCII、LFA-1等分子表达的情况。ELISA法检测4T1/IL-17、4T1/pcDNA3.1和4T1细胞培养上清诱导RAW264.7细胞分泌IL-6水平。研究为IL-17基因疫苗早日进入临床治疗肿瘤提供实验依据，理论及实践意义深远。为肿瘤细胞因子基因治疗提供了一定的理论依据，具有较大的临床应用价值。 |
