地区：上海市 宝山区
关键词：安徽省立医院;南京医科大学第一附属医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000004020
成果描述：
| 该项目属于感染病学领域。据WHO报道，全球约有20亿人感染过HBV，其中约3.5亿人为慢性乙型肝炎患者，每年约100万人死于HBV相关并发症：肝衰竭，肝硬化，肝癌。肝纤维化是慢性乙型肝炎进展的必经阶段。因其早期可逆，肝纤维化的早期诊断和治疗具有重要的临床意义。肝脏组织病理学检查是肝纤维化诊断的“金标准”，但其创伤性、不可重复性以及出血、感染、死亡等并发症限制了其临床应用。的肝纤维化血清学检查指标（HA、PCⅢ、CⅣ、LN，FIB-4等）虽然简便、快捷、无创，但受多因素的影响，其灵敏度和特异度均较低。因此，探索新的肝纤维化无创诊断模型尤为必要。课题组探索了Wnt信号通路与肝纤维化程度的相关性，以下内容从三个方面详细介绍：研究Pygo2介导的Wnt信号通路在肝纤维化进展中的作用机制：经典Wnt信号通路启动后，β-catenin在细胞核内聚集后向细胞核内转移，在Pygo2的作用下与受体结合，启动一系列基因的表达。课题组以传统的CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型为基础，通过分子克隆技术以及尾静脉注射，将商路蛋白（PAP）以及Mest基因导入大鼠体内抑制Wnt信号通路，研究其对大鼠肝纤维化的影响。结果显示，PAP或Mest能下调肝脏β-catenin mRNA以及蛋白表达，同时肝脏胶原纤维表达迅速减少，肝纤维化程度明显改善；说明抑制Wnt信号通路能延缓大鼠肝纤维化进展。在细胞水平，课题组将PAP基因转染入肝星状细胞（HSCs）内，观察HSCs生物学特性的变化，结果显示，细胞Pygo2、β-catenin、α-SMA mRNA以及蛋白表达明显减少，HSCs活性明显下降。这些结果证实了Pygo2及相关分子介导的Wnt信号通路在肝纤维化进展中的重要作用。血清Pygo2浓度能准确反应患者肝组织的纤维化程度：为进一步探索Pygo2介导的Wnt信号通路与患者肝组织纤维化程度的关系，课题组纳入了195例受试者并进行肝脏组织学分级（G）和分期（F），检测Wnt相关蛋白在患者血清和组织中的水平，结果表明Pygo2血清浓度能准确反应患者肝脏纤维化程度，其相关性优于TIMP-1、FIB-4和β-catenin。Pygo2和LSM联合诊断模型的建立：对于195例受试者，课题组进一步完善其他肝纤维化指标检查以及肝脏硬度检测（liver stiffness measurement, LSM），统计学分析表明，Pygo2具有良好的诊断价值，优于其他肝纤维化指标以及TIMP-1和FIB-4。以77.43ng/ml为cut-off值，Pygo2诊断肝纤维化的灵敏度和特异度分别为81.1%和80.3%。在该基础上课题组进一步探索新的无创诊断模型，结果显示，以5.6kPa为cut-off值，LSM联合血清Pygo2能显著提高肝纤维化诊断的灵敏度（87.9%）和特异度（85.2%）。课题组增加了使用人群，结果显示，该模型操作简单，可重复操作，结果稳定。该项目阐明了Pygo2介导的Wnt信号通路在肝纤维化进展中的作用机制，并建立了基于Pygo2的肝纤维化的无创诊断新模型，该模型无创，操作简单，可重复性好，价格低廉，可在中国普遍开展。同时，该模型使部分患者避免了肝脏穿刺，减少了操作风险，节约了社会成本。再者，该模型能作为各种慢性肝病治疗的随访指标，评估治疗效果和预后。该模型已被省内外多家医院借鉴和使用，获得了一致好评，极大的提升了该科的学术知名度，产生了良好的社会效益。总共发表论文12篇，其中SCI收录论著4篇，论著摘要3篇，权威期刊1篇，核心期刊3篇。项目组成员多次应邀参加国际学术会议并作大会报告，得到广泛认可。 |
