地区:上海市 宝山区
关键词:河北医科大学
成果类型:其它
成果领域:生物与新医药
成果编号:A2021061000002724
成果描述:
| 该研究采用USP22沉默、构建USP22失活突变体和USP22基因错意突变等基因重组、细胞生物学、分子生物学实验技术,研究USP22的单核苷酸多态性对酶活性的影响及其对HeLa细胞周期和凋亡的影响,对认识USP22去泛素化酶活性在肿瘤发生、发展中的作用机制具有重要意义。采用siRNA干扰技术,流式细胞术及荧光定量PCR的方法证实沉默USP22对HeLa细胞的凋亡不产生影响,但可以引起HeLa细胞细胞周期阻滞,USP22可以通过调节细胞周期来调节HeLa细胞的增殖,这一作用可能是通过c-Myc/cyclin D2,BMI-1和p53的途径来实现的。利用点突变的方法成功构建了失活突变体USP22(C185S),并将其转染至HeLa细胞中,结果表明USP22在失去活性后,对HeLa细胞的细胞周期就失去其调节功能,而且对细胞周期相关的因子p53,BMI-1,c-Myc,cyclin D2也不在具有调节作用,结果为研究USP22对HeLa细胞周期的调节机制奠定了基础。 |