地区：上海市 宝山区
关键词：辽宁出入境检验检疫局;宁波出入境检验检疫局;烟台出入境检验检疫局;吉林出入境检验检疫局
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000002533
成果描述：
| 为保护国家珍稀动物（梅花鹿等），建立陆生、水生动物生物资源库，减少濒危动物物种的灭绝；为减少国内某些企业用伪品冒充真品出口，影响中国的国际贸易形象，开展生物物种鉴定方法，同时，也对影响经济动物健康养殖的多种相关疫病检测技术进行研究。创新点和研究成果：（1）针对选定国家珍稀保护动物梅花鹿、马鹿等鹿属动物，设计特异性引物，建立了物种特异性PCR和多重PCR鉴定方法；针对鳕鱼、普氏野马进行鉴定的物种特异性PCR方法；针对珍稀动物松江鲈鱼（国家Ⅱ级保护动物）和海洋经济动物中国鲎、河豚鱼的物种特异性荧光定量PCR检测方法；基于线粒体序列（COI、16SrRNA、16SrRNA-COI）和核基因序列（18SrRNA）进行分析的海参种类鉴定技术；基于扇贝筛选了物种特异的SSR位点，用于扇贝物种的鉴别；建立了针对这些目标动物的鉴定技术平台，这些鉴定方法中PCR方法的检测限均能达100拷贝/反应，敏感性高，特异型好，解决了针对这些动物及其相关制品的物种鉴定问题。其中对河豚鱼、鳕鱼、普氏野马、松江鲈鱼、中国鲎等物种的鉴定研究均是国内首次；此为该项目首要的重要技术创新点。（2）在国内率先研制出犬瘟热病毒（CDV）、犬细小病毒（CPV）两项动检领域重要经济动物疫病国家标准样品。采用冷冻干燥技术，解决了系列猪病病毒标准样品的均匀性和稳定性的技术难题，这两种经济动物疫病病毒标准样品的成功研制填补了国内动检领域的相关研制空白，为动检实验室对相关经济动物疫病进行进出境检疫和科学研究提供了相关有证国家标准样品的需求，是重要技术创新点。（3）通过DICP方法、PCR、电镜及动物回归试验，分离获得3株水貂阿留申病毒（ADV）分离毒株，命名为ADV-LN1、ADV-LN2、ADV-LN3，并将其序列上传到GENBANK数据库，通过全基因组测序和进行系统进化分析，得出该分离株为远离欧美的新毒株，明确了辽宁地区ADV的分子流行病学发展趋势；利用基因工程手段获得重组蛋白作为抗原建立了检测犬瘟热病毒和水貂阿留申病的间接ELISA方法并优化为试剂盒，和国外同类试剂盒重复率可以达到96%；国内首次建立了检测水貂阿留申病毒（ADV）的两种荧光PCR（染料法和探针法）方法，最低检测限可以达到10拷贝/反应。上述两种方法均呈现特异性强、重复性和稳定性好特点，适用于水貂阿留申病的检测和诊断，此为重要创新点。（4）国内首次建立了同时检测犬瘟热病毒（CDV）、犬腺病毒II型（CAV-II）和犬副流感病毒（CPIV）的三重PCR和鉴别检测犬细小病毒（CPV）和犬冠状病毒（CCV）的双重PCR方法。这5种病临床上易出现相似类群症状，经常混合感染，该创新点能显著提高了这五种类症群疫病的检测效率，降低了检测成本。发表论文21篇（其中SCI论文1篇，核心期刊20篇），编著书籍2部，制定了SN行业标准6项，研制国家标准样品2项。该研究资助培养了2名博士、4名硕士。 |
