地区：上海市 宝山区
关键词：河南省人民医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000002400
成果描述：
| 人食管癌相关基因4(esophageal cancer related gene 4，ECRG4，C2ORF40)在人体正常组织中广泛表达，然而ECRG4基因和其活性蛋白在食管癌中的作用还不清楚。该项目构建ECRG4过表达和低表达载体，同时成功获得高纯度可溶性重组ECRG4蛋白。研究发现重组ECRG4蛋白体外抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞周期G1期阻滞；体内抑制裸鼠移植瘤生长。启动子甲基化是ECRG4在食管癌中转录失活的主要机制。该项目利用TMT标记定量蛋白质组分析，发现食管癌细胞中ECRG4蛋白过表达上调蛋白数310，下调蛋白数175，包括CDK4、PLOD2、PLOD1、PLK1、SNIP1、P65等，影响多个细胞周期和凋亡等相关信号分子。临床食管癌配对组织芯片标本验证，ECRG4蛋白表达与CDK4、PLOD2、PLOD1、PLK1具有相关性；Western blot检测，ECRG4过表达下调CDK4、PLOD2、PLOD1、PLK1，ECRG4低表达上调CDK4、PLOD2、PLOD1、PLK1。ECRG4过表达，抑制核转录因子p65转录激活，下调环氧化酶-2(COX-2)，不影响p65抑制因子IκBα的表达水平。同时ECRG4过表达下调SNIP1、P65、BCL2、BCL-XL，ECRG4低表达上调SNIP1、P65、BCL2、BCL-XL；SNIP1低表达下调P65、BCL2、BCL-XL，ECRG4和SNIP1同时低表达，BCL2和BCL-XL下调程度降低。通过免疫共沉淀实验，发现ECRG4过表达降低SNIP1与P65结合稳定性。同时ECRG4低表达抑制细胞凋亡，SNIP1低表达促进细胞凋亡；ECRG4和SNIP1同时低表达，细胞凋亡增加程度降低；ECRG4低表达促进细胞增殖，SNIP1低表达抑制细胞增殖；ECRG4和SNIP1同时低表达，细胞增殖抑制程度降低。并且在裸鼠移植瘤组织标本中也发现ECRG4高表达下调SNIP1、P65、BCL2、BCL-XL蛋白表达，Tunel染色分析食管癌细胞凋亡增加。ECRG4通过调控SNIP1与P65结合，调节NF-κB通路下游信号分子，影响食管癌细胞周期和细胞凋亡。该项目研究还发现ECRG4与跨膜丝氨酸蛋白酶11A(TMPRSS11A)相互作用，调节细胞周期相关蛋白P21表达，影响细胞周期。因此，ECRG4是食管癌候选抑癌基因，重组ECRG4蛋白可以作为食管癌潜在的生物治疗药物，具有重要的临床应用价值。ECRG4通过NF-κB通路影响细胞周期和细胞凋亡，在食管癌中发挥其抑癌作用，在食管癌的发生发展中扮演了重要角色。ECRG4基因和蛋白的肿瘤转化研究结果具有广阔临床应用前景和良好的社会经济效益，在食管癌临床诊断治疗和预后判断中起到了很好的辅助作用。 |
