地区：上海市 宝山区
关键词：河南中医药大学;河南省医药科学研究院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000002313
成果描述：
| 该项目来源为国家自然科学基金面上项目，项目编号：81072799/H2708。该课题于2013年课题部分成果获得中华中医药学会科学技术成果三等奖，2016年9月获得省级鉴定，2017年获得河南省教育厅科学技术成果一等奖。该项目通过文献评述、抑制剂研究、补阳还五汤联合MSCs移植作用体内脑缺血模型动物实验研究，发现补阳还五汤联合MSCs移植对脑缺血有一定的改善作用，其分子作用机制为激发与促进血管新生的相关因子表达；通过血管新生改善脑组织缺血状态，为补阳还五汤联合MSCs移植治疗缺血性脑血管疾病提供实验基础。主要的技术内容及机制研究如下：主要技术内容：采用分子生物学及蛋白质学相关技术，进行血管新生级联事件相关因子研究：运用免疫组织化学法检测缺血脑组织模型凝血因子Ⅷ、CD34的表达；Elisa法检测大鼠血清VEGF、整合素αvβ3、MMP-2、MMP-9的含量；Q-PCR检测FAK基因表达、免疫印迹法检测模型动物缺血组织VEGFR-2、FAK和pFAK的蛋白表达及对信号通路蛋白AKT或ERK的影响，并从形态学观察中药对模型缺血梗死体积的影响。主要的机制：1、补阳还五汤联合MSCs能够改善脑缺血再灌注大鼠神经缺损症状评分，显著减小脑缺血后梗死范围，尤其在用药后第7天最为明显。2、补阳还五汤联合MSCs移植能够显著增加血清整合素（αVβ3）含量及与血管相关因素CD34含量，对应用抗CD34+CD45抗体后MCAO模型的p PAK具有升高作用，由此发挥血管新生的作用。3、补阳还五汤联合MSCs移植能够拮抗阿瓦斯汀对MACO模型大鼠血清VEGF含量的降低及脑组织VEGF的表达的抑制作用，有效提高VEGFR2含量和其磷酸化水平。其调节VEGF和VEGFR-2表达的增加可能通AKT或ERK信号通路，从而诱导内皮细胞增殖和迁移，促进血管新生，参与脑缺血再灌注后的修复过程。4、补阳还五汤联合MSCs移植通过降低TIMP-1干预后脑缺血模型大鼠缺血脑组织Ⅷ因子数量，起到抗凝血、抑制血栓的形成，达到促进血管新生，发挥脑保护作用。而且补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植与TIMP-1协同作用，使大脑中动脉梗塞再灌注大鼠血清MMP-9、MMP-2表达显著下降，且随着联合干预时间延长协同作用得以加强，最终在48h达到最高，因而通过抑制细胞外基质的降解，发挥对血脑屏障碍保护作用，防治缺血后脑水肿的形成。通过该项目的实施，研究成果显著，先后发表论文17篇，其中SCI收录2篇，中文核心期刊收录14篇，著作1部，培养博士研究生3名，硕士研究生12名。 |
