地区：上海市 宝山区
关键词：海南医学院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000002261
成果描述：
| 该项目属于医学检验技术领域，在建立新型real-time PCR方法和设计合成新的荧光探针分子方面中取得了较大的成果。项目内容分为两部分，一部分是建立核酸定量和分型的real-time PCR方法，另一部分内容是设计合成新的荧光探针分子用于标记核酸引物。第一部分内容，课题组首次提出和设计了新型二聚体荧光突变引物，建立新型real-time PCR核酸定量检测系统的科学设想。该新型二聚体突变荧光引物既具有染料法对新生双链DNA示踪并进行基因分型的能力，又具有探针法高特异性准确定量的优点，是一种高通用性、高特异性和灵敏性、操作简单、价廉的新型real-time PCR方法，可在各种核酸定量检测的临床和科研领域广泛应用。以此引物为基础，项目组建立了HBV、HCV、沙眼衣原体、真菌等的核酸定量和基因分型检测方法，通过方法学评价和与美国FDA认证的国外核酸定量试剂盒进行比较，发现本法的临床检测性能与国外试剂盒相当，而且降低了检测成本并缩短了检测时间。第二部分内容，为改进标记二聚体突变荧光引物的荧光基团获得具有自主知识产权的荧光探针分子，课题组根据晶体场理论、软硬酸碱理论、空间匹配效应设计合成荧光化合物。新合成的荧光探针分子，除具有标记核酸的能力外，课题组发现其中3种荧光探针还可以分别特异性地检测Zn离子、Ag离子和Cu离子，建立了检测金属离子的方法。新型二聚体突变引物技术的报道得到了国内外同行的高度关注。发表在英国SCI收录杂志《Journal of Clinical Pathology》上的论文被美国明尼苏达大学生物医学图书馆负责研发和管理的BioMedLib系统评选为年度分子诊断领域内二十大论文之首。德国Heinrich-Heine-University的MacKenzie教授主编的专著《Methods in Molecular Biology》专门设立一章来介绍二聚体突变荧光引物技术，项目负责人夏乾峰受邀担任编委。国内检验医学领域的权威杂志《中华检验医学杂志》、《临床检验杂志》均以进行了重点报道。该项目建立的核酸定量和分型新方法以及合成的新荧光探针分子为临床核酸检测和金属离子检测提供了技术支撑。 |
