植物携带检疫性病原生物快速检测关键技术的研制及应用

地区:上海市 宝山区

关键词:上海出入境检验检疫局;中山出入境检验检疫局;上海市浦东新区农业技术推广中心

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000001343

成果描述:

中国自2001年加入WTO以来,与植物及植物产品相关的国际贸易日趋频繁,一方面进境植物繁殖材料因携带多种检疫性病原菌威胁中国的农业生产,另一方面打破国外农产品的技术壁垒也一直是中国十分关注的重大课题。该项目自2005年开始针对口岸数量庞大种类繁多的进出境植物最容易携带的番茄黑环病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、香石竹环斑病毒、李痘病毒和黄瓜黑星病菌等24种病毒和6种真菌建立了快速灵敏的分子检测技术,并研制了部分病毒的血清检测试剂盒和胶体金免疫层析试纸条,同时制定了相应的病原菌检疫鉴定标准,这些成果为进一步提高口岸检疫性病原菌的截获及促进中国农产品顺利出口提供了更加有效的技术保障。经项目鉴定和科技查新,整体成果达到国际先进水平。其主要研究成果如下:建立了直接从蔬菜种子检测黄瓜绿斑驳花叶病毒的高灵敏度免疫磁珠RT-PCR和实时荧光RT-PCR方法,首次确认该检疫性病毒传入上海郊区的蔬菜基地,并配合上海市农业技术推广中心迅速开展全市范围内的病毒普查、监管和除害处理,极大保护了上海地区的农业生产安全。建立了植物种苗多种病毒的快速筛查方法。对百合种球及非洲菊组培苗中的南芥菜花叶病毒、草莓潜隐环斑病毒等10余种病毒建立了多重RT-PCR方法,实现了种苗病毒的高通量检测;同时针对上述病毒及兰花和玉米上的主要病毒还建立了环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP),其灵敏度比普通RT-PCR高10-100倍,可在1-1.5h内完成检测;自主研制了快速、灵敏和特异的检测李痘病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒和南芥菜花叶病毒的胶体金免疫层析试纸条,检测时间缩短为0.5-1h,可对种苗病毒进行快速的初筛。研究了可致松树死亡而中国未见发生的松球果锈病菌、北美松疱锈病菌、松纺锤瘤锈病菌和松干基褐腐病菌及严重为害香蕉生产的香蕉苞片花叶病毒、香蕉束顶病毒和香蕉枯萎病菌等多种病原生物的检测技术,为保证中国农林业的生产安全提供了技术储备。成功研发了非洲菊组培苗脱除多种植物病毒的关键技术,为非洲菊组培苗的顺利出口提供了技术支撑。项目共制定了国家标准12项、检验检疫行业标准11项和上海市地方标准1项;获得国家授权发明专利11项;发表SCI文章2篇、国内核心期刊论文26篇、出版科技专著1部。 项目成果已经推广应用到上海、中山、北京、天津、云南、广东等10多个检验检疫口岸局以及上海和广东地区蔬菜、花卉和林木基地的病害普查、检测和防治。2013-2015年上述口岸共在近百批的进境植物中检出了南芥菜花叶病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒、番茄斑萎病毒、番茄黑环病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、草莓潜隐环斑病毒和李痘病毒等,防止了检疫性有害生物对中国的入侵,间接挽回难以估计的巨大经济损失。项目成果的应用不但缩短了口岸进境植物的检测周期,提高了病原菌的截获率,确保对大量种子苗木进境后在种植基地内的病害监管,而且极大地促进了中国植物种苗的顺利出口。项目成果应用近3年来,新增产值935.12万元,节支金额达3468万元,取得了显著的经济效益和极好的社会效益。
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