地区：上海市 宝山区
关键词：广西中医药大学附属瑞康医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000000554
成果描述：
| 结肠癌因高发生率、高致死率严重影响患者生存质量，增加医疗负担。健脾清热活血方是课题组在全国名老中医广州中医药大学劳绍贤教授经验方指导下化裁而成，临床研究发现该方能明显减轻溃疡性结肠炎患者腹泻、黏液脓血便、腹痛等症状，改善肠道功能，延缓病情的进展。在国家自然科学基金资助下，从Wnt/β-catenin-TCF信号通路介导溃疡性结肠炎相关癌变观点出发，探讨中药健脾清热活血方防治溃结相关癌变作用及人结肠癌SW480细胞Wnt/β-catenin-TCF信号通路β-catenin核内转位及下游特异性靶基因表达以及中药健脾清热活血中药含药血清的干预作用。该项目通过建立溃结相关癌变小鼠模型，比较高、中、低剂量健脾清热活血组和模型组小鼠结肠黏膜超微结构变化及形态学及其超微结构的影响，结肠β-catenin核内表达及转位变化及SW480细胞Wnt/β-catenin-TCF信号通路及下游特异性靶基因表达的影响。结果发现，溃结癌变模型组小鼠上皮细胞大小不等，排列紊乱；细胞核浆比例增大，核上移；胞核不规则，可见明显核仁；细胞内线粒体、高尔基体、核糖体大量增生，线粒体局灶可见明显扩张、肿胀。而治疗组结肠黏膜癌变超微结构均较模型组有不同程度改善，镜下可见上皮细胞体积明显变小，核染色质边集、核固缩，核膜断裂，核碎裂，细胞器明显扩张肿胀、碎裂，其中中、高剂量组癌变改善效果更佳，镜下可看到上皮细胞明显变小、空泡化，凋亡小体形成，局灶可见坏死。模型组β-catenin、TCF-4、C-myc、CyclinD1mRNA表达呈上升趋势，治疗组β-catenin、C-myc、CyclinD1mRNA表达呈下降趋势，与模型组比较有统计学意义（P＜0.05）。正常组大肠黏膜中β-catenin呈胞膜表达，无胞浆和(或)胞核表达，而在溃结相关癌变结肠黏膜中，均不同程度存在β-catenin异位表达和膜表达缺失，且呈逐渐升高的趋势。离体结果显示,健脾清热活血中药对人结肠癌SW480细胞有明显的抑制作用，10%的含药血清浓度24h时就有明显的抑制作用（P＜0.05），其抑制率是57.86%。应用流式细胞仪检测，治疗组干预SW480细胞作用24h后，低剂量组凋亡率10.12±1.41%、中剂量组凋亡率13.58±1.27%，高剂量组凋亡率11.43±1.31%，空白组凋亡率8.53±1.19%，低于治疗组（P＜0.05）。综合在体和离体实验结果，均充分证明健脾清热活血类方药具有缓解溃结相关癌变的效用，以中剂量疗效最为明显。其效应靶点可能与调控β-catenin表达，逆转β-catenin核内积聚，减少C-myc、CyclinD1转录相关。该项目的完成证明了健脾清热活血方对溃疡性结肠炎相关癌变有确切治疗作用，为健脾清热活血方的应用提供科学依据，对降低溃疡性结肠炎患者相关癌变发生率将起到积极作用。通过该项目的研究，课题组对溃疡性结肠炎相关癌变之“脾虚为本，湿热毒瘀为标”中医证候本质有了新的认识，同时，为健脾清热活血大法治疗溃疡性结肠炎相关癌变提供理论支持，为溃疡性结肠炎相关癌变中医药防治提供新的思路及治疗手段，相关成果已在国内中文核心期刊发表论文4篇，培养硕士1名。 |
