一种表达产生枯草芽孢杆菌精氨酸酶的基因工程菌构建方法及新技术

地区:上海市 宝山区

关键词:武汉远大弘元股份有限公司

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000004923

成果描述:

项目所属科学技术领域、主要内容、特点及应用推广情况:技术领域:该发明属于生物技术领域,具体涉及:一种高水平表达产生枯草芽孢杆菌精氨酸酶的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法,一种利用大肠杆菌基因工程菌生产L-鸟氨酸盐酸盐的方法。主要内容:该项目主要内容涉及:提供一种高水平表达产生枯草芽孢杆菌精氨酸酶的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法,提供一种利用大肠杆菌基因工程菌生产L-鸟氨酸盐酸盐的方法。构建的大肠杆菌工程菌株保藏于中国典型培养物保藏中心。特点:使用的精氨酸酶多是来自高等动物肝脏的1型精氨酸酶,克隆表达动物肝脏来源的1型精氨酸酶时,需要由其mRNA反转录成cDNA,再行PCR扩增出精氨酸酶的基因才能和载体重组,手续繁杂,操作困难。而PCR细菌基因则简单方便得多,利用大肠杆菌基因工程菌表达枯草杆菌精氨酸酶,具有安全高效,手续简便的特点,所表达的融合蛋白不但保持了高效表达的特性,酶蛋白的表达量达到细菌总蛋白的30%。而且精氨酸酶融合蛋白得到正确的折叠,在融合蛋白的形态下,表现出很高的酶活性,可以满足工业生产的要求。发酵培养得到菌体不需要破壁处理即可以直接用于催化L-精氨酸转化生产L-鸟氨酸。工程菌菌体产量和酶活性均已达到工业化生产水平要求。用微生物产生的精氨酸酶代替动物来源的酶,不仅开辟了新酶源,而且能够减少动物传染疾病的机会,有利于产品出口。应用推广情况L-鸟氨酸是已经研究过的能够刺激脑垂体诱导释放生长激素的最有效能的氨基酸,生长激素能够促进脂肪代谢,肌肉生长和肝细胞的再生,有利皮肤和组织伤口的愈合和修复。研究显示,鸟氨酸能够促进胸腺、肝脏和心脏组织的再生、加强肌肉的生长,增强免疫系统的功能。2011年项目技术已实现产业化,2012-2014年完成产值5000多万元,出口创汇300多万美元,上缴税收600多万元,获得发明专利证书2件,项目产品质量符合日本AJI、美国FDA、欧洲EP、中国CP等国内外先进标准的要求。
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