地区：上海市 宝山区
关键词：南京农业大学;普莱柯生物工程股份有限公司;江苏南农高科技股份有限公司
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000004538
成果描述：
| 猪圆环病毒病是因猪圆环病毒2型（PCV2)感染引起的一种全球性重要猪传染病，发病率达40%～50%，死淘率在20%以上，仅中国每年经济损失超过100亿元。由于存在病毒培养滴度低、疫苗抗原规模化制备技术瓶颈及诊断技术准确性低等世界性关键技术难题，加上该病诱发因素复杂，国内外长期缺乏有效的防控措施。该项目在国家科技支撑计划等资助下，经过14年系统攻关，成功研制出PCV2灭活疫苗、诊断试剂及抗应激和PRRSV混合感染控制等综合防控技术，改变了完全依赖进口疫苗的局面，实现了中国对该病的有效防控，推动了生猪养殖业持续健康发展。1 .创建了高滴度PCV2培养细胞系，分离鉴定出中国PCV2b优势流行毒株。发现中国存在PCV2a向PCV2b的基因漂移和基因重组现象，明确了中国PCV2优势流行毒株为PCV2b基因型。分离鉴定出高纯净和高免疫原性的PCV2b SH毒株。通过PCV2感染细胞精准检测和筛选，构建了能稳定生产高滴度PCV2的PK15-B1细胞系，病毒滴度提高100倍以上，攻克了PCV2培养滴度低的世界性技术难题，为PCV2研究和疫苗创制及产业化奠定了关键性基础。2.创建疫苗生产工艺和质量标准，创制了中国第一个猪圆环病毒病疫苗。发明了高密度细胞培养技术，创建了高效低成本的疫苗生产工艺新技术，建立了国际上首个用于PCV2疫苗免疫效力检验的小鼠试验替代方法，制订了疫苗制造与检验规程及质量标准，创制出安全高效的猪圆环病毒2型灭活疫苗(SH株)，实现了规模化生产。疫苗在全国广泛推广使用，显著降低了PCV2感染和发病，解决了该病防控的关键性技术难题。3.发明了PCV2特异偶联抗原，创制出PCV2抗体和抗原检测技术和试剂盒。发明了PCV2特异表位合成肽偶联抗原和单克隆抗体，创建出PCV2 ELISA抗体检测试剂盒和免疫微球检测试剂，并研制成功中国首个猪圆环病毒聚合酶链反应检测试剂盒，攻克了PCV2与PCV1因抗原交叉性高而难以鉴别检测的技术难题，为该病诊断和免疫评估提供了可靠技术和方法。4.发现了猪圆环病毒病的3个重要诱发因素，创制出相应防控技术和产品。发现了热应激、氧化应激及PRRSV混合感染是猪圆环病毒病的重要诱发因素，研制出具抗氧化应激作用的猪源益生菌制剂和安全稳定的PRRSV自然弱毒活疫苗（R98株），实现了产业化生产，显著降低了PCV2亚临床感染，并解决了PRRSV和PCV2混合感染难题，提高了猪圆环病毒病的综合防控水平。该成果获国家发明专利7项，国家新兽药注册证书3个，国家和行业技术标准2个。疫苗专利技术转让7家兽用生物制品企业，获技术转让费4180万元。在全国28个省市推广使用疫苗2.33亿头份，新增产值7.28亿元，新增利润2.31亿元。发表研究论文78篇，其中SCI论文30篇，影响因子78.72,被他引366次，出版专著2部。获中国专利优秀奖2项，2009年大北农科技奖“科技成果奖”1项。 |
