地区：上海市 宝山区
关键词：青岛市妇女儿童医院;青岛市市立医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000004402
成果描述：
| 该项目以两株转移能力不同的肺癌细胞株（95D和95C）为研究对象，研究微小RNA(microRNA,miRNA)在上皮间质化与肿瘤干细胞形成中的作用，探索miRNAs在肺癌侵袭转移中的机制，为肺癌的诊断和治疗提供新的方案和新的靶点。 该研究发现：①高通量miRNA芯片检测发现，在高转移肺癌细胞株95D中miR-544a高表达，并通过QPCR进行验证；②将miR-544amimic转染95C，获得miR-544a高表达细胞株，通过transwell和划痕实验发现95C的侵袭和转移能力显著增加；③采用TargetScans和双荧光素酶报告系统，证实CDH1、GSK-3β为miR-544a的靶基因；④miR-544a可以通过下调CDH1、诱导细胞发生EMT，下调GSK-3β激活Wnt/β-catenin信号通路，促进肿瘤细胞的侵袭和转移，由此可见miR-544a在肺癌的转移中可能起到十分重要的作用；⑤过表达miR-544a的细胞株，肿瘤干细胞表面标志CD133上调，促进细胞形成肿瘤球。这些研究结果为肺癌的早期诊断、靶向生物治疗、预后判断、抗肿瘤药物的研发提供了新的方案和新的靶点。检测miR-544a的表达水平可以用于肺癌病人的诊断、治疗、预后判断及新药研发，该方法已在青岛市各大医院广泛应用。 该研究属多项技术自主创新，经文献检索，国内外未见相关报道，技术创新点如下：①采用高通量miRNA芯片和QPCR在95D和95C中筛选差异表达的miRNAs；②通过细胞转染技术获得miRNA高表达的细胞；③采用生物信息学预测miRNA的靶基因，并用双荧光素酶报告系统加以验证；④在细胞水平通过transwell实验和划痕实验研究miRNA在肺癌细胞侵袭和转移中的作者用；⑤在蛋白水平，通过Westernblot实验研究miRNA靶基因及信号通过中有关蛋白的表达水平变化，探索miRNA促进肺癌细胞侵袭和转移的机制。以上研究结果为首次报道。 该项目建立了荧光定量PCR检测细胞中miR-544a表达的方法，该方法已在各大医院广泛应用，有利于病人的诊断及预后判断。 在该项目研发及应用的6年中，研究成果发表在国内外杂志10余篇，其中SCI收录文章4篇，EI收录文章1篇，核心期刊文章5篇，主编论著1部；并培养2名博士生，带教1名本科生。 |
