地区：上海市 宝山区
关键词：青岛大学附属医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000004398
成果描述：
| 所属领域：缺血性脑卒中的防治技术。 立项背景：急性氧化应激反应和迟发性炎症反应是造成脑缺血损伤的重要机制，通过抑制或减轻脑缺血后急性氧化应激反应和迟发性炎症反应，有望成为治疗缺血性脑卒中的有效措施之一。现代医学研究表明，西藏胡黄连的主要有效成分胡黄连苷II具有清热燥湿、抗脂质过氧化、抗炎等作用。细胞培养和动物实验证实，胡黄连苷II能减轻氧化应激诱导的PC12细胞L02细胞的损伤，降低细胞内活性氧水平。动物实验研究表明，胡黄连提取物可抑制大鼠脑缺血半影区的细胞凋亡，改善动物神经功能。 主要内容：该研究首先建立大鼠脑缺血模型，按照二因素四水平【L16(45)】正交试验设计原理分组，在不同的缺血时间经腹腔注射不同剂量的胡黄连苷II干预治疗，通过神经行为学、组织细胞超微结构病理学、原位末端标记和流式细胞术等证实，胡黄连苷II能抑制脑缺血损伤引起的神经细胞凋亡，改善神经细胞和血脑屏障的形态结构及动物的神经行为功能。生物化学、免疫组化、酶联免疫吸附、WesternBlot和RT-PCR等分子生物学实验表明，胡黄连苷II可降低脑缺血损伤后神经元特异性烯醇化酶和神经胶质标志蛋白表达水平，提高髓鞘碱性蛋白表达水平，对神经细胞、神经胶质细胞和神经纤维髓鞘发挥保护作用；通过下调脑组织水通道蛋白4表达水平，降低胶质细胞足突膜的离子通透性而减轻脑水肿程度；通过抑制基质金属蛋白酶9、细胞外信号调节蛋白激酶1/2和环氧合酶2等炎性因子表达，减轻炎症反应而发挥抗炎作用；通过提高血清和脑细胞内超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性，降低脂质过氧化物丙二醛、一氧化氮和过氧化氢等自由基的水平而发挥抗氧化作用。其最佳治时间窗和剂量为脑缺血1.5～20h腹腔注射10～20mg/kg体重。为脑缺血损伤的防治提供了新思路，为中药胡黄连的开发应用提供了理论和实验依据，达到了国际先进水平。 主要创新点：根据正交试验设计原理，研究了胡黄连苷II对缺血性脑损伤的保护作用及其最佳治疗剂量和治疗时间窗，为研发胡黄连制剂奠定了理论基础。通过神经行为学、病理学、原位末端标记和流式细胞术，证实了胡黄连苷II能抑制脑缺血引起的细胞凋亡，改善神经细胞和血脑屏障的结构及大鼠神经行为功能。通过分子生物学技术，阐明了胡黄连苷II在脑缺血损伤中的抗炎和抗氧化作用机制，为脑缺血损伤的防治提供了新思路，为胡黄连的开发应用提供了理论和实验依据。 应用推广情况：该研究成果已在省内多家单位推广应用，取得了满意的效果。近年来已有10多名研究生利用该研究成果开展科研工作，顺利完成毕业论文。该研究的许多学术观点已被《中西医结合医学导论》引用，有关实验技术已被《中西医结合实验技术》引用，并作为该院中西医结合医学专业研究生试用教材。曾多次参加国内外学术交流，已发表学术论文20篇，其中被SCI收录7篇。2014年获山东中医药科技成果三等奖，2015年获青岛市科技进步二等奖。 |
