地区：上海市 宝山区
关键词：舟山出入境检验检疫局综合技术服务中心;浙江海洋学院;宁波卫生职业技术学院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000003637
成果描述：
| 该项目为2014年度浙江省科技计划项目(分析测试科技计划项目)，计划编号为2014C37108，主要调查冰鲜海产品中常见食源性致病菌微生物污染情况，并针对常见的对食源性致病菌进行快速检测技术研究。国内外致病菌检测方法众多，但是各种方法都存在其自身的优势和局限性。多重荧光定量PCR是在荧光定量PCR的基础上，通过使用多对引物和相应的探针，实现在同一个反应体系中对多个目标序列进行同时检测，具有特异、灵敏、迅速、准确、高效、污染少等优点。该研究通过对副溶血弧菌tlh、沙门氏菌Ompc和单增李斯特菌hly基因的分析，设计特异性的引物与探针，建立海产品中副溶血弧菌、沙门氏菌和单增李斯特菌的多重荧光定量PCR快速检测方法。无论是培养方法还是快速检测方法，为得到能够满足要求的检测灵敏度仍然离不开前增菌或选择性增菌，而现有的增菌方法是不同的菌株采用各自的选择性增菌培养基进行增菌处理，不符合同一平台的同时检测多种致病菌的发展趋势。该研究基于沙门氏菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌特性及共性，研制了能同时富集沙门氏菌、副溶血弧菌和单增李斯特菌的共增培养基(SVL)。经研究表明经SVL培养基增菌后能够直接应用于后续的检测中，可提高检测效率。该研究运用SVL复合增菌联合多重荧光定量PCR方法，对浙江省舟山地区码头、农贸市场、工厂等冰鲜鱼进行抽样检测,探明了舟山地区冰鲜海产品中沙门氏菌、副溶血弧菌和单增李斯特菌的流行情况。通过2年的实验，探索和推广应用，建立了沙门氏菌、副溶血弧菌和单增李斯特菌复合增菌培养基结合多重荧光定量PCR检测体系，并在水产加工企业和相关检测机构推广应用，产生了较为显著的社会和经济效益，证明该课题具有较高的应用价值，值得推广。该课题发表学术论文3篇，申请发明专利2件，授权实用新型专利2件。 |
