转基因生物安全评价与检测关键技术研究与应用

地区:上海市 宝山区

关键词:中国农业大学

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000003206

成果描述:

随着转基因技术的发展,转基因生物安全问题在国内外已经引起极大的关注。尤其在近几年中国出现了一系列涉及到转基因生物及其产品的案件和纠纷,如雀巢转基因食品标识纠纷,美国转基因大豆进口许可证风波等,还有如今沸沸扬扬的转基因稻米市场化争议,国内越来越多的学者开始意识到生物安全评价体系研究的重要性。课题来源于国家“863”计划项目和转基因重大专项。该课题组多年来从事转基因生物安全评价与分子检测工作,现已建立转基因生物安全评价与分子检测关键技术体系,广泛应用于研发、检测监测、安全评价、体系监管等工作领域,主要包括以下几个方面:1、转基因作物快速、精准及高通量检测技术研究。在国内首次构建了以转化体为单元、以定性PCR为核心技术,覆盖筛选、基因特异性、构建特异性、转化体特异性四个层次的转基因作物检测方法标准体系框架;开发了新型通用引物多重PCR检测方法,可对转基因大豆、番木瓜等10种以上常见转基因作物原材料及加工品混合样品进行快速、精准检测,特异性良好,最低检测限均可达0.1ng;优化了环介导等温扩增技术体系,成功研发出LAMP快检试剂盒、等温PCR仪及快速检测试纸条,使检测时间缩短至常规检测的1/3,大大提高了检测效率,产品在全国10余家转基因生物安全检测机构得到推广应用,取得了良好的社会效益和经济效益。该成果发布国家标准12项,专利6项,共发表论文10篇,其中SCI论文7篇,在本领域达到国内领先水平。2、转基因产品品系特异性检测新技术研究。建立了随机片段破碎基因组步移新技术、Loop-linker PCR和A-T Linker Adapter PCR基因组步移新技术;并且在反向PCR的基础上,建立DNA Looping技术体系;以上技术成功获得转基因玉米LY038和转基因大豆DP-356043-5等转基因作物的侧翼序列。建立包括转基因玉米、水稻、油菜等10余种转基因作物的品系特异性定性定量检测技术体系。该成果获得国家专利1项,发表SCI论文3篇,属国际领先水平。3、建立转基因生物外源蛋白高效表达与评价体系。针对转基因生物外源蛋白的多样性,建立了原核(大肠杆菌、乳酸菌)、酵母、哺乳动物细胞及无细胞等多种高效表达技术体系,并建立了包括表观分子质量、免疫原性、翻译后修饰、飞行质谱分析和生物活性等方面的蛋白活性评价技术体系。该成果成功应用于中国自主研发的抗虫、耐除草剂、营养改良型等各种类型的转基因作物的外源蛋白体外表达,推动了中国转基因作物食用安全性评价技术的发展。该成果发布国家标准4项,专利3项,共发表论文5篇,其中SCI论文3篇,属国际领先水平。4、毒理与非期望效应评价技术体系。在传统毒理学检测方法的基础上,首次提出动态无损检测概念,应用于受试动物的肠道健康与代谢组学评价,率先建立了以肠道组织病理切片、肠道菌群结构、肠道代谢物、肠粘膜渗透性、肠道免疫等方面组成的动物肠道健康非期望效应评价技术体系,为转基因生物的毒理与非期望效应评价开辟了新的思路和方法。该项成果发布国家标准2项,共发表论文15篇,其中SCI文章10篇,属国际领先水平。5、转基因生物过敏性评价技术体系。完善了生物信息学、体外模拟消化、蛋白质热稳定性、动物致敏模型等关键技术方法,形成了系统的转基因生物外源蛋白致敏性评价技术体系,并建立了转基因生物过敏性评价数据库。广泛应用于中国自主研发的转基因玉米、水稻、小麦、棉花等作物的致敏性评价。该项成果发布国家标准4项,共发表论文5篇,其中SCI论文2篇,属国际领先水平。6、该项成果在国内首次建立了系统完善的转基因作物精准检测方法标准化研究理论体系,确定了转化体特征序列、检测引物、反应体系和反应程序等核心技术参数及其标准化研究工作程序。该项目共研制转基因食用安全及分子检测国家标准27项,专利10项,共发表论文35篇,其中SCI论文22篇,为转基因生物评价标准化提供了理论规范和科学指导。
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