地区：上海市 宝山区
关键词：许昌学院;郑州大学;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000002395
成果描述：
| 针对中国基层动物疫病诊断与食品安全检测设备落后、技术力量薄弱的现状，自2011年开始，通过项目组成员开展了环介导等温扩增技术(LAMP)的研究并进行了推广应用，从而实现了基层动物疫病诊断与食品安全监管部门对食源性致病菌与掺假肉的可视化检测。主要技术内容：1)针对限制环介导等温扩增技术(LAMP)应用的假阳性率高的瓶颈问题，研究发现引起假阳性主要原因是引物二聚体引起的非特异性扩增与气溶胶污染；2)动物源性致病菌与动物源性基因LAMP检测方法的建立；3)借鉴PCR扩增技术，通过引物优选以及二甲基亚砜、尿素、甜菜碱等复配增强剂解决了LAMP扩增中引物二聚体引起的非特异性扩增；并优选了沙门氏菌检测的特异性LAMP引物；4)合成了偶氮苯囊泡镁离子探针，通过镁离子间接测定LAMP扩增副产物焦磷酸根，实现了LAMP反应的不开盖可视化检测，降低了LAMP反应的气溶胶污染；并系统研究了引物与模板之间的不同位点、不同类型错配对环介导等温扩增的影响，获得了具有重要借鉴意义的结论；5)通过自主开发的配套装备进行液面下LAMP反应，解决了核酸扩增领域公认的气溶胶污染的难题，将LAMP技术由实验室研究进行了集成与应用。授权专利情况：该项目相关研究成果获国家授权发明专利1项、实用新型专利1项，另有5项发明专利、1项实用新型专利处于实质审查阶段；发表论文20篇，其中SCI收录8篇，EI收录5篇，中文论文6篇；著作1部。技术经济指标：该项目研究开发的食源性致病检测试剂盒，单次检测成本2元左右，而市场PCR检测试剂盒为60元以上；开发的掺假肉检测试剂盒，单次检测成本2元左右，目前PCR检测的市场价格也在200元以上，因此，该项目研究开发的检测技术具有较高的利润空间。该项目研究开发的可视化基因检测技术，技术完善成熟，国内领先国际一流，所应用的领域不仅仅局限于食源性致病菌与掺假肉检测，也可以应用于转基因产品检测、医学诊断、动物疫病诊断等领域，产品示范推广后，保守估计，将为国家每年节省2亿元的检测费用，出口创汇将达到每年5-10亿元。该项目发明的配套设备，解决了核酸等温扩增中常见的气溶胶污染问题，同时实现了核酸等温扩增结果的实时可视化判读，另外，该装置成本低，单台市场价格低于2000元，适合于基层动物疫病诊断及食品安全监督与执法部门应用，推广应用后将显著增强基层部门对动物疫病诊断与食源性致病菌的检测以及对掺假肉的监督监管能力，维护消费者的权益，提高政府的公信力。应用推广及效益情况：目前部分产品由河南康鸿食品生物科技有限公司试制生产，生物标识快检产品与装备河南省工程实验室、许昌市食品质量与安全检测重点实验室、许昌学院食品与生物工程学院监制，在许昌一达新能源科技有限公司中应用，并由郑州深巷实业有限公司在食品药品监督管理局基层站所推广试用并面向全国经销。 |
