地区：上海市 宝山区
关键词：浙江医院;杭州市上城区紫阳街道社区卫生服务中心
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001706
成果描述：
| 课题来源与背景：课题来源：该项目来源于浙江省中医药管理局优秀青年人才基金项目（课题编号：2012ZQ003）。骨关节炎是中、老年人常见的慢性退行性疾病，膝关节是最常见的受累关节，其发病率呈逐年上升趋势，成为老年人关节疼痛和致残的重要原因之一。膝骨关节炎属于中医“痹证”范畴，寒气是痹证主要的致病因素之一，根据“寒者热之”的治疗原则采用具有温经散寒作用的温针灸疗法，在临床取得一定的疗效。关于膝骨关节炎的病理机制的研究主要集中在各种细胞因子及蛋白酶等，相关研究面窄、指标单一、重复多，突破性进展少。基因芯片是高效率、高通量、平行分析细胞或组织表达谱的一种方法，可以同时检测与分析上万种不同基因的表达情况，使课题组能够全面获得各种刺激引起的基因表达改变的信息。利用基因芯片技术可以从一个新的角度认识针灸的作用机制。鉴于此，该课题拟通过切断前交叉韧带建立膝骨关节炎模型，采用基因芯片技术检测骨关节炎的基因表达，建立膝骨关节炎及温针灸干预的基因表达谱，筛选出有意义的差异表达基因，对筛选的差异表达基因进行聚类分析和功能分类注释，采用RT-PCR、免疫组化验证基因芯片的结果，确立可能的目标基因。研究目的与意义该研究拟从温针灸干预后的基因表达谱变化、目标基因的角度初步阐明温针灸治疗膝骨关节炎的目标基因，为今后临床应用温针灸防治膝骨关节炎提供可靠的实验依据。主要论点与论据通过该研究得出以下结论：第一，KOA模型膝关节软骨存在差异基因Crabp2、MMP-3、Timp-1、MMP-14、Stat3、MMP-2、Ddit4、Akt2等，可能与KOA的发生、发展有关，有望成为潜在的治疗靶点；第二，KOA模型差异基因主要涉及血管发育、老化、活性氧代谢过程调节、膜蛋白复合物、正性调节钠离子转运等生物过程，表明KOA的发生与多基因功能的失调有关。第三，温针灸治疗KOA可能的目标基因为Ddit4、Id4、Jun及Bmp5，从而发挥延缓软骨退变的作用，提示温针灸治疗KOA的可能作用机制。第四，温针灸治疗KOA主要涉及与免疫、炎症反应调节相关的生物过程。主要的论据包括以下研究结果： KOA模型组与空白组差异基因根据筛选条件，共筛选出KOA模型与空白对照组差异基因134个，其中上调的基因为37个，下调的基因为97个。升高的基因如：Crabp2、MMP-3、Timp-1、MMP-14、Stat3、MMP-2等，降低的基因如：Ddit4、Akt2等。 KOA模型组与空白组差异基因GO功能富集分析对筛选到的134个差异表达基因进行了GO功能注释和功能显著性富集分析，其中前30个GO term分别被注释到3个本体论，包括血管发育、老化、活性氧代谢过程调节、膜蛋白复合物、正性调节钠离子转运等。 温针灸治疗的差异基因根据筛选条件，共筛选出温针灸组与KOA模型组差异基因104个，其中上调的基因为53个，包括：Jun、Bmp5、Id4、Ddit4等，下调的基因为51个，如Slfn3等，对差异基因进行聚类分析图。 温针灸组GO功能富集分析对筛选到温针灸治疗改变的95个差异表达基因进行了GO功能注释和功能显著性富集分析，其中前30个GO term分别被注释到2个本体论，即生物学过程与分子功能，从研究结果来看，温针灸主要GO功能富集与免疫、炎症反应相关。 |
