荧光分子探针技术在食源性病原菌检测中的应用

地区:上海市 宝山区

关键词:广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000001621

成果描述:

该项目建立8种沙门氏菌种类鉴定方法,5种致泻性大肠杆菌种类鉴定方法,MRSA鉴定方法,单增李斯特氏菌特异检测及毒力基因检测方法MLST分型方法。1.根据甲型副伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌特异序列,设计引物和TaqMan探针、MGB-TaqMan探针,建立三重荧光、四重荧光PCR对8种沙门氏菌进行种间鉴别的方法;2.根据肠致病性大肠杆菌、 肠产毒大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、产志贺毒素大肠杆菌、肠黏附性大肠杆菌的特异序列和毒力基因,设计引物和探针,分别建立双重、四重荧光PCR鉴定致泻性大肠杆菌的方法;3.根据MRSA的特异基因和耐药基因,建立三重荧光PCR检测方法。4.根据单核细胞增生李斯特氏菌特异基因和毒力基因建立MGB-TaqMan探针三重荧光PCR检测方法,根据单核细胞增生李斯特氏菌7各管家基因建立多位点序列分型方法,对进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌进行分型,揭示该菌的基因型别,为该菌的溯源分析提供基础数据;建立的方法特异性高,敏感性强,在进出口食品微生物检测工作中缩短检测周期,提高工作效率,具有较好的推广应用前景。
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