地区：上海市 宝山区
关键词：新疆维吾尔自治区人民医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001584
成果描述：
| 该研究主要技术内容包括：标本收集。相关生化指标的测定：对急性冠脉综合征组(n=200例)及非冠心病组(n=100例)患者外周血进行生化指标的检测，进行统计分析。基因检测：DNA提取、单核苷酸多态性位点检测：TaqMan法检测SNP,在实时定量荧光PCR仪上进行绝对定量PCR扩增，PCR反应结束后继续做等位基因分布检测。微粒的分离：对抽取的外周血进行离心，获得富含血小板血浆(PRP)，静置后离心移除绝大部分的血小板，取上清液，获得无血小板血浆(PFP)，移除上清后取沉淀，获得不含血小板血浆的微粒。同样的方法采集红细胞微粒及内皮细胞微粒。流式细胞仪检测微粒：检测前PFP血浆常温下解冻，采用流式细胞仪技术检测PMPs。同样的方法检测红细胞微粒、内皮细胞微粒及血小板源微粒水平，观察其变化。微粒的致血栓活性测定：用急性冠脉综合征患者和非冠心病人群的血小板源性微粒和红细胞微粒分别作为催化剂，以不同浓度加到非冠心病患者无微粒血浆中，添入荧光标记的凝血酶底物启动凝血反应并迅速在荧光光读仪上用Gen5微量板数据收集和分析配套软件每间隔1分钟测得数据，总测60min，获得血凝块形成的不同时期，从而分析血小板源性微粒及红细胞微粒的致血栓活性。应用推广及社会效益：揭示染色体9p21上rs1333049基因多态性在新疆维吾尔族和汉族心肌梗死患者中的分布特征。染色体9p21上的rs1333049位点CC与CG基因型为维吾尔族心肌梗死的易感相关危险基因型；C等位基因为维吾尔族心肌梗死患者患病的危险等位基因。揭示了急性冠脉综合征的发生与血小板源性微粒的关系。揭示了急性冠脉综合症的发生与红细胞源微粒的关系。急性冠脉综合征患者的外周血红细胞源性MPs含量显著升高及致血栓形成的高峰时间前移，可诱导凝血酶生成，为急性冠脉综合症的发生机制提供了新的理论依据。此外，揭示了急性冠脉综合征的发生于内皮细胞源微粒的关系以及内皮细胞微粒水平与血脂的关系。同时观察维吾尔族、汉族ACS患者血液中内皮细胞MPs水平及其与血脂的关系，对急性冠脉综合征患者进行亚组(急性心肌梗死和不稳定性心绞痛)分析，进一步比较各亚组中微粒水平及细胞来源并检测其致血栓活性。项目组相继完成维、汉两组急性冠脉综合征患者的临床特点及生化指标的对比分析及维、汉两组急性冠脉综合征患者的分子生物学指标的对比分析，并相应的完成国家自然科学基金项目的结题工作。在自治区卫生厅及自治区人民医院的指导及支持下以开展现场专项讲座和健康教育的方式，在新疆地方卫生系统及乡村、社区进行了推广应用工作。有效提高了上述基层医疗单位及人民对急性冠脉综合征的预防、诊断、治疗水平。明显改善了急性冠脉综合征的防治现状。为分子诊断方法在临床上的应用创造条件及为急性冠脉综合征斑块不稳定性机制的研究提供新论点和新思路。 |
