地区：上海市 宝山区
关键词：福建省立医院;中国人民解放军南京军区福州总医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001223
成果描述：
| 主要技术内容：微生态活菌制剂应用于肠屏障功能障碍存在几个问题：一是制造与保存难度较大，二是活菌在肠道黏附定植的数量较少，三是活菌在肠屏障功能障碍患者肠道可能由于局部气体和生长底物的不足而难以足量繁殖，且如果该菌穿过肠壁，也可促进败血症的发生。因此，如果能研究和开发一种全新的微生态制剂，既可避免活菌制剂的不足，又使其具有一般活菌制剂调整肠道菌群、阻止致病菌入侵的作用，且可抑制炎症细胞因子、阻止炎症发展，从而更好地维护肠粘膜屏障的完整性，将具有重要的现实意义。该项目采用化学层析法从双歧杆菌培养上清液中分离纯化的具有生物学活性的蛋白质—粘附素，较系统地进行了体外和体内实验，探讨其抑制多种致病菌对肠上皮细胞的粘附活性；探讨其对肠上皮细胞系增殖/凋亡活性及细胞间连接的影响并进而探讨其对上皮细胞内调节致炎因子表达的转录因子NF-KappaB活性的影响，以评价其生物调节活性；最后直接在缺血-再灌注大鼠模型上评价其对创伤诱导的肠粘膜通透性增加及细菌易位的防治作用，观察粘附素对肠上皮细胞和肠粘膜屏障的保护作用，并从组织学和分子水平探讨其阻止炎症发展的机制及内在规律。研究发现：该双歧杆菌分泌型粘附素能特异性地介导双歧杆菌呈线性粘附于肠上皮细胞周围，纯化粘附素介导的双歧杆菌对肠上皮细胞的粘附具有特异性，且粘附具有浓度和时间依赖性；粘附素在体外能有效地抑制多种致病菌对肠上皮细胞的粘附，维持肠上皮细胞增殖与凋亡的平衡；粘附素在大鼠体内体内可改善肠缺血再灌注损伤后肠道菌群失衡，减少肠道有害细菌易位及内毒素血症的发生，保护肠粘膜屏障功能，其机制可能与粘附素抑制TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8等多种炎性细胞因子的表达有关。技术经济指标及应用推广情况：该研究主要结果已有9篇在《World Journal of Gastroenterology》、《中华内科杂志》、《中华消化杂志》等杂志上以论著形式全文发表，在第二届北京国际消化疾病高峰论坛交流。其中1篇被SCI收录，3篇被Medline收录，8篇被CBM收录，8篇被CMCI收录，6篇被CSCD收录，7篇被万方收录，7篇被同方收录，9篇被维普收录。总共被34篇次论文引用（其中在SCI数据库中被引用8篇次）,他引31篇次。主要研究成果先后在军地8家医院推广，开拓了相关学科同行视野及临床思路，获得广泛好评。课题组对双歧杆菌分泌型粘附素的研究，提示其作为一种无细胞生态制剂可能在抑制炎症细胞因子、阻止炎症发展以及维护肠粘膜屏障的完整性方面具有一定的作用。该研究成果不但可为多器官功能衰竭的临床防治提供新的思路，还可为进一步克隆该类细菌基因并制备和评价同类重组蛋白创造条件，具有重要的学术和应用价值。粘附素的提取、纯化工艺并不十分复杂，成本较低，易实现产业化，可逐步向临床过渡，为肠屏障功能损伤的临床防治提供一种新的选择，可产生重大的经济和社会效益。 |
