地区：上海市 宝山区
关键词：广西医科大学第一附属医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000005822
成果描述：
| 课题来源与背景：中药现代化就是在继承发扬中医药优势和特色的基础上，充分利用现代科技和方法，研发出安全、有效、质量稳定、易控制的现代中药产品，使其达到国际化水平。该课题旨在全面建立“复方地龙胶囊”的质量控制方法，为科学规范地评价和控制“复方地龙胶囊”的质量提供参考依据。根据中医药理论，中药复方制剂系多成分组成，因此，在评价、控制中药复方制剂的质量时，将各有效成分的含量作为质量控制指标进行含量测定，对于保证中药复方制剂质量的有效性、稳定性、可控性具有重要意义。技术原理及性能指标：通过热浸提法和超声波提取法，并有效结合大孔吸附树脂分离技术，对复方地龙胶囊进行样品前处理，分离提取得到各目标成分，利用薄层色谱（TLC）法对复方地龙胶囊中的地龙、川芎、黄芪和牛膝中的所得成分及其标准药材和对照品分别进行定性鉴别。并采用高效液相法（HPLC）对复方地龙胶囊中分离提取得到的次黄嘌呤、阿魏酸、黄芪甲苷及β-蜕皮甾酮进行含量测定，并通过购买国家法定对照品，有效计算胶囊中所含各组分的含量。为其质量研究提供有效的方法和手段。完善复方地龙胶囊的质量标准。技术的创造性与先进性：该制剂为复方制剂，成份复杂，因此样品前处理较为困难，该课题在热浸提法，超声波提取法的基础上，结合大孔吸附树酯柱分离洗脱技术,有效地去除水溶性色素成分,再采用饱和的正丁醇水洗至中性,有效地排除了背景干扰,使薄层扫描测定准确，是该课题的关键技术。首次采用HPLC法对地龙活性物质次黄嘌呤、川芎活性物质阿魏酸、黄芪活性物质黄芪甲苷、牛膝活性物质β-蜕皮甾酮进行定量分析研究，分别考察了不同的提取溶剂和提取方法以及不同的色谱柱及流动相对结果的影响，最终确立了提取方法及色谱条件，使主成分保留时间适中，分离度良好，方法简便，专属性强，重现性好、线性关系良好等特点，填补了质量标准中该项空白。技术的成熟程度，适用范围和安全性：中药化学物质复杂，且在不同中药中可能含同一个成分在中药中也可检测到。因此单一用标准品去对复方中药进行定性鉴别存在一定的缺陷，因此研究在以标准品为对照的基础上，加以标准药材对复方地龙胶囊中的地龙、川芎、黄芪及牛膝进行定性鉴别。在对复方地龙胶囊中地龙、川芎、黄芪及牛膝TLC鉴别方法的研究过程中，参考2010版《中国药典》（一部）及大量文献的基础上，分别采用多种不同供试品处理方法及展开剂进行试验，优化了4种药材的TLC鉴别方法。结果表明，复方地龙胶囊中地龙、川芎、黄芪及牛膝色谱斑点清晰、分离效果好，具有重现性好、专属性强、简便、快速等特点，可作为复方地龙胶囊定性鉴别的依据。中药复方新药的质量控制应选择与临床适应症相关的有效成分作为含量测定的指标，否则，质量控制的意义不大。次黄嘌呤为地龙主要药效成分之一，而现代医学研究认为地龙具有镇静抗惊厥、解热、平喘、抗血酸等生物活性可能与其含量的高低有着密切的关系。而阿魏酸为川芎主要成分之一，具有清除自由基、抗血栓、抗菌消炎、抑制肿瘤等作用。黄芪中主要成分为黄芪甲苷，其具有免疫调节、器官保护、降糖、抗炎的药理作用。牛膝的现代研究表明，其含有的三萜及蜕皮甾酮有抑制破骨细胞分化、促进骨样细胞增殖，促进蛋白质的合成作用。综上所述，次黄嘌呤、阿魏酸、黄芪甲苷及β-蜕皮甾酮的的现代药理作用与复方地龙胶囊的功效相吻合，该研究选取以上四个指标性成分作为复方地龙胶囊质量研究基础。应用情况及存在的问题：为进一步完善复方地龙胶囊的治疗标准，该研究利用TLC及HPLC技术对复方地龙胶囊中的地龙、川芎、黄芪及牛膝进行了定性及定量研究，并取得了一定成果。但该课题组认为不光要在复方成型后再对其进行质量控制，因为药材的产地及采收季节对于药材的影响很大，并终将影响到复方制剂的质量，因此建议在对胶囊进行质量控制的同时，加强对原料药材的控制，同时制定相应的标准。复方地龙胶囊进一步的质量控制工作，该课题组认为应落在复方的指纹图谱及原料药的指纹图谱的研究上，结合该次研究的质量控制方法，将进一步完善复方地龙胶囊的质量控制，提升其控制标准。结合该次研究结果，应进一步建立薄层色谱指纹图谱，TLC是利用中药成分在薄层上层析后分离机分离后各组分相对位移值的不同而进行鉴别的一种方法，因其操作简便、快速、经济等特点成为常用的测定指纹图谱的方法。TLC的另一大优势是能够提供直观形象的可见光或荧光图像，比柱色谱多了色彩这一可比参数，并可进一步配合色谱扫描或数码处理得到不同层次轮廓图谱和相应的积分数据，尤其适合日常分析检验和现场检验。高效液相色谱指纹图谱（HPLC），HPLC法是利用中药各组分在固定相和流动相中迁移速率的不同而进行分类的一种分析方法。其具有分离效能高，分析速度快等优点。如运用二极管阵列检测器，可得到三维图谱，可以用于成分比较复杂紫外光区有吸收的药物分析。尤其对成分差别较细微的单味药材及成分较为复杂的复方制剂。 |
