地区：上海市 宝山区
关键词：广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000005494
成果描述：
| 任务来源：“新病害-红点病的病原学及防治技术研究”由广西壮族自治区科学技术厅于2008年下达，项目编号：桂科青0832020。项目经费为人民币四万元，项目承担单位为广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所。项目研究的背景及意义：芒果是世界著名的亚热带水果，享有“热带果王”的美称，深受消费者喜爱。广西是中国的芒果主产地之一，2005年栽培面积和产量分别占全国的25.6%和25.2%，仅次于海南省。芒果产业在广西占有重要经济地位。芒果红点病2001年在海南省三亚市首次被发现。初期症状为果实上出现针尖大小，圆形或近圆形，褐色或黑色坏死斑，周围有红色晕圈。罹病果实后期果皮上出现褐色或黑褐色裂纹，严重时裂纹布满整个果皮，使果实外观变差，商品价值下降。该病在海南省被发现后短短几年时间已成为海南省芒果上的重要病害，但至今病因仍不明确，因而用药无针对性，防治效果不佳。而随着苗木等繁殖材料的调运和商品果实的流通，病害也随着扩散，2007该病在百色被发现。若不及早采取有效的防治措施，该病极有可能成为制约该区芒果生产发展的又一重要病害，不利于果农收入的提高和该区经济的发展。因此，十分有必要开展芒果红点病的病原学、防治技术等方面的研究。研究成果对提高芒果产量、外观品质和商品价值，促进芒果生产的发展，增加果农收入具有重要的意义。研究内容和取得的成果：致病菌的分离、纯化及柯赫氏法则测定采用组织分离法进行病原菌的分离，并进行单孢纯化，获得纯培养。病菌在PDA平板上28℃下培养7d后，用无菌水配成约2×105cfu/mL的孢子悬浮液，接种于健康芒果上，保湿48h，3 d后出现与田间相似的症状，再分离得到与原来相似的分离物，确定所得分离物为红点病的致病菌。培养性状、形态特征观察将病原菌接种在PDA平板上，在25℃、12 h光照(黑光灯)、12 h黑暗交替的条件下培养。菌落棉絮状，初为白色，后随着培养时间的延长，菌落变灰白色或墨绿色，有轮纹；分生孢子无色，单孢，长椭圆形或卵形，两端钝圆或一端尖锥形，大小(12.2～16.7)μm×(4.2～6.1)μm，平均15μm×5.2μm，n=100。附着孢多数棒状，少数具裂片，大小(4.5～6.9)μm×(5.6～9.1)μm，平均7.6μm×5.5μm，n=100。分生孢子盘有大量或无刚毛。病菌的生物学特性研究：温度对菌丝生长、产孢及孢子萌发的影响菌丝生长、孢子萌发的温度范围均为13℃～37℃，适温范围均为25℃～31℃，孢子形成的温度范围为16℃～37℃，最适温度为34℃。pH对菌丝生长、产孢及孢子萌发的影响菌丝生长、孢子形成、孢子萌发的pH值范围广，均为3.0～11.0，适宜pH分别为pH4.0～8.0，pH 4.0～7.0，pH5.0～9.0。不同碳、氮源对菌丝生长、产孢的影响在供试碳源中，以葡萄糖、蔗糖、菊糖为碳源菌丝生长良好；以菊糖为碳源最适产孢。在供试氮源中，以硝硝酸钾为氮源时菌丝生长良好；以甘氨酸为氮源时产孢量最大。不同培养条件对菌丝生长、产孢的影响营养及光照条件对菌丝生长、产孢有明显影响，在PSA、PSA+酵母膏培养基上菌丝生长良好；在PSA+酵母膏培养基上产孢量大；光照对产孢具有促进作用。寄主范围：测定测定病菌对包括芒果在内的25种植物的致病力，结果表明：病原菌除浸染芒果外，还可侵染草莓、葡萄、淮山、龙眼、木薯、番茄、苹果、梨，不能侵染荔枝、鹅掌、剑麻、木瓜、辣椒、番桃、柑桔、豌豆、茄子、桂花、芦荟、西瓜、三角梅、扶桑、鸡蕉、茉莉。多基因分子鉴定对病菌2个菌株的ITS、GPDH、、ACT、CHSⅠ和TUB2五个基因进行测序,将得到的序列在NCBI网站上用BLAST软件进行同源性比较。得到的序列在GenBank的登录号：JF730185、JF730186、JF730187、JF730188、JF730189、JF730190、JF730191、JF730192、JF730193、JF730194。结合病菌的形态特征、生物学特性和寄主范围测定结果，将芒果红点病菌鉴定为炭疽菌属Colletotrichum sp.。防治技术研究：室内药剂筛选采用菌丝生长速率法测试了12种杀菌剂在室内对病菌的抑制效果，结果表明：45%咪鲜胺水乳剂(450μg/mL)、25%丙环唑乳油(250μg/mL)、12.5%腈菌唑乳油(250μg/mL)、25%苯醚甲环唑乳油(100μg/mL)处理区的菌落生长受到完全抑制，生长抑制率均为100%；80%代森锰锌(1600μg/mL)、12.5%烯唑醇(73.5μg/mL)和75%百菌清(1000μg/mL)处理区的抑制率分别为89.83%、76.34%和75.79%；其余药剂处理区的抑菌效果均在60%以下。田间防治试验选用咪鲜胺、代森锌、多菌灵、百菌清等药剂结合搭棚避雨等农业防治措施进行。结果咪鲜胺的防治效果最好，对病害的控制效果可达65%。成果的创造性和创新性：芒果红点病的病原菌鉴定、防治技术等方面此前未能查到相关的研究报道。该项目研究利用多基因的序列分析结合形态学，明确了该病致病菌的分类地位，为炭疽菌属Colletotrichum sp.，并筛选出了较好的防治药剂和方法，为今后的防治工作指明了方向。存在的问题：炭疽菌属内种的传统分类依据是形态学差异和寄主植物，一直比较混乱。通过ITS序列分析结合形态学可将属内的种区分开，但对于关系比较紧密的不同种，单靠ITS序列来界定种的分类还不够准确。利用多基因的序列分析进行炭疽菌属种的分类更可靠，但由于这方面的研究刚起步，很多资料还很缺乏，GenBank中很多炭疽菌尚无GPDH、ACT、CHSⅠ和TUB2等基因的序列公布，可借鉴的资料很有限。因此未能将病原菌鉴定到种。 |
