地区：上海市 宝山区
关键词：广西医科大学
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000005409
成果描述：
| 该项目来源于广西科技研究与技术开发项目“肝癌新标记物用于肝癌早期诊断研究体系的建立和应用研究”(桂科攻10124001A-2)。利用改良的SEREX技术从广西肝癌人cDNA文库和人胚胎干细胞cDNA文库中筛选到了30个与肝癌相关的新肝癌相关抗原标记物，通过基因测序和生物信息学分析明确了这30个新肝癌相关抗原的基因序列及主要功能。对部分新筛选的肝癌相关抗原，利用定量RT-PCR、RT-PCR、原位杂交RT-PCR、免疫组织化学等方法再次在多种病人血清、组织细胞水平进行验证以进一步确定这些肝癌相关抗原与肝癌关系的密切程度。采用基因工程技术构建、表达和分离纯化了三种肝癌相关抗原(SMP30、CNN2和GP73)，探索了最佳的载体构建和表达方法。以这些表达的基因工程重组蛋白为抗原，构建了间接ELISA检测试剂盒，用于检测肝癌患者血清抗SMP30和抗CNN2抗体，同时，构建了双抗原夹心ELISA方法检测血清中抗GP73抗体的试剂盒。建立了ELISA法检测血清中抗肝癌相关抗原抗体的最佳工作浓度。获得了良好的批内和批间重复性。间接ELISA方法检测到部分肝癌患者血清中存在有抗SMP30和CNN2肝癌相关抗原的抗体，在AFP阴性的肝癌患者中，SMP30抗体检出率较AFP阳性血清检出率高一倍，提示SMP30对AFP阴性的HCC病例诊断有较好的弥补作用，将SMP30和AFP两者联合诊断，肝癌检出率可提高至90%。采用双抗原ELISA方法检测肝癌患者血清中的抗GP73抗体，发现肝癌病人血清中GP73抗体水平明显高于正常人，检测方法已申请了专利。已在广西壮族自治区肿瘤医院、广西医科大学第一附属医院等对肝癌病人、肝硬化、肝炎、部分其他肿瘤(胃癌、鼻咽癌、肺癌等)以及正常人血清共计约3000多人份进行检测应用，应用前景看好。如能进一步做好病人检测后跟踪随访工作，将有利于进一步将这些试剂盒应用到肝癌筛查、预后判断等工作中。课题“肝癌肿瘤抗原SMP30的构建、表达和免疫活性分析”，2008年获广西科技进步三等奖。 |
