地区:上海市 宝山区
关键词:重庆文理学院
成果类型:其它
成果领域:生物与新医药
成果编号:A2021061000005359
成果描述:
通过对养殖户送来20多尾患病中国大鲵样品的发病大鲵临床症状进行研究。其主要病理症状表现为:健康大鲵染病后病灶扩散及其迅速,症状与患病大鲵极为相似,主要表现为四肢肿胀、脚趾指溃烂、局部皮肤腐烂,并出现溃疡灶。根据患病大鲵的临床症状、行形态特征、培养特性、生化鉴定等试验,采用微生物学方法及分子生物学方法对大鲵烂腿病病原菌进行分离,获得两株菌株,经鉴定,其为嗜水气单胞菌和肺炎克雷伯氏菌。人工感染试验及毒力测试显示,它们均能感染大鲵,致使烂腿病发生。该试验为该病防治策略的制定及疫苗的制备、开发奠定了基础。大鲵烂脚病病原菌的毒力测定。采用从患病大鲵组织分离所得的致病菌嗜水气单胞菌(编号为WL3-X2)进行毒力测定,分别感染健康大鲵及健康中华鳖。结果显示,其对健康鳖的LD50为106.8 cfu/g,而对健康大鲵的LD50为107.3 cfu/g。对几种大鲵疾病病原菌进行药敏试验,结果显示,烂腿病病原菌之一的肺炎克雷伯氏菌对克林霉素、痢特灵、多粘霉素B、万古霉素、麦迪霉素、红霉素、庆大霉素、青霉素等药物有耐药性。而大鲵肠炎致病菌CQWL008对大黄、五倍子、黄芩均具有敏感性,对五倍子高度敏感,也对这几种中草药组成的中草药复方高度敏感灭活疫苗的制备。病原菌培养和收集、灭活、无活菌检验、安全性检测、效力检验、分装与保存、留样待检等环节,制备出了用于注射的大鲵烂腿病疫苗。经检测,疫苗已完全灭活、各项检测指标均正常、安全性良好。用制备的注射疫苗,注射免疫4周后取试验大鲵和对照大鲵各15尾,肌肉注射0.2 ml浓度为1.0×108的菌液攻毒,观察5周。记录死亡个数,并进行病理检验,计算相对存活率及保护率。结果显示,注射疫苗组和对照组的存活率分别为60%、13.3%。根据试验组大鲵的存活率、存活时间进行分析显示,该研究所得灭活疫苗对大鲵具有保护效应,免疫保护率为53.8%。 |