TNF-α介导下菟丝子作用于人蜕膜细胞、血管内皮细胞基因表达谱的研究

。主要论点与依据：菟丝子为补肾安胎的要药，其安胎的效果为大量的临床实践证实，药理研究表明其有性激素样作用，能够改善生殖内分泌物功能，对母胎界面免疫因子具有一定调节作用。在母胎界面，对于其发生药效的机制特别是分子机制研究较少，尚不足以阐明药物作用的机制，因而疗效难以重复，从单一药物作用延伸到复方药物作用的机理，是中医药研究的可行路线之一。基于此，该研究菟丝子作用于肿瘤坏死因子-α介导下体外诱导培养的人子宫蜕膜基质细胞、血管内皮细胞基因表达谱分析，以期阐明菟丝子在妊娠蜕膜重塑、胎盘血管重铸等方面所可能作用的靶基因，在基因水平上研究菟丝子补肾安胎的内在分子机制。创见与创新：该技术以人全基因组芯片对比确定药物作用后转录水平基因表达谱及其差异，并进行生物信息学分析，确定药物关联性转录谱特征，成功建立体外细胞培养体系及细胞模型。从分子水平初步确定菟丝子补肾安胎的可能药物靶标。社会经济效益，存在的问题：该研究属于临床用基础研究，菟丝子已在临床广泛应用，通过研究，初步了解菟丝子在母胎界面母胎免疫调节、蜕膜细胞凋亡、胎盘血管重铸等方面所可能作用的靶基因，为进一步研究其可能作用的分子机制奠定基础，为丰富中医药理论内涵，为临床用药提供可靠依据，也为临床开发中医药新药及对复方进一步研究打下基础。但因芯片数据分析难度较大，全基因芯片基因数量多，还需进一步数据挖掘及聚类、分类集群分析等，确定筛选可能作用的表达差异的基因群，反向用western blot进行蛋白表达的逐一验证。历年获奖情况：该研究成功的进行了人体外蜕膜细胞、血管内皮细胞的培养及鉴定，病进行了细胞造模。通过基因杂交，基因表达谱芯片分析，菟丝子含药血清作用于TNF-α诱导的人早孕蜕膜细胞后与正常空白组对比的基因表达谱共检出基因9856条，其中上调基因81条，下调基因62条，表达上调的已知基因主要为细胞周期依赖性蛋白激酶和抑制剂基因，DNA损伤及修复基因，另外还有氧化压力和炎症损伤基因等。表达下调的基因与细胞营养、生长，细胞周期、信号转导相关。作用于人血管内皮细胞基因表达谱共检出基因7346条，其中上调基因78条，下调基因45条。表达上调的已知基因主要为细胞因子及受体、生长分化相关基因、转录相关基因、凋亡相关基因、信号转导相关基因，表达下调的主要为细胞周期相关基因、凋亡相关基因、核酸酶相关基因等。研究成果公开发表学术论文4篇，中文核心1篇，一般国家级杂志1篇，省级论文2篇。培养硕士研究生1名，已毕业。