地区：上海市 宝山区
关键词：首都儿科研究所
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001366
成果描述：
| 研究目的：开展肺炎支原体（Mp）流行特征分析、耐药及血清学诊断方法的创新研究可为Mp暴发流行监控及耐药等诊断治疗提供有效手段。传统的监测及诊断方法操作复杂、特异性低，不适用于临床标本的应用。该项目对Mp进行了近30年研究，探索出了适用于Mp临床标本的分型监测、耐药检测和血清学诊断的成熟完备方法，被国内外同行接受和采用。主要科学发现：用于流行监测和临床特征分析的基因分型体系和检测方法的创新：建立采用4个VNTR位点的改良MLVA分型体系，解决了“原MLVA分型法基因型过多（70-80型），不适用于流行病学监测的缺陷”，首次使基因型与临床特征相关性分析成为可能。通过新体系完成2003-2012年北京地区Mp流行基因型特征分析，及中国与澳大利亚、中国与美国基因型比较，首次提出Mp基因型存在地域差异、中国Mp高耐药率与其基因型特征有关的新发现。该改良体系已被国际同行接受，并应用于其后的Mp流行基因型研究。建立采用4个VNTR位点的“单管一步法”改良MLVA分型方法（mPCR-CE），简化原有MLVA分型方法“10管两步”缺陷。获得国家发明专利。建立可对临床标本直接分型的改良P1-RFLP法，解决原有方法“需在3-7天繁杂Mp培养获得菌株后才能进行分型”的问题，可简单快速地对临床标本进行P1分型。获得国家发明专利。适合临床标本快速、简便、高通量的耐药基因检测方法创新：建立Mp耐药基因nPCR-CE-SSCP检测方法，可快速、准确、高通量地检测Mp耐药突变基因；解决了已知的耐药基因检测方法耗时、费力的问题。建立Mp单管SNP耐药基因快速检测方法，该法简单易操作。获得国家发明专利，适合在基层推广应用。用于研制特异性高的血清学抗体检测试剂盒候选抗原成分的创新：项目组在国内首先建立了Mp培养分离法、经典的间接血凝及酶联免疫血清学检测法，研制的含多种Mp抗原表位的基因重组蛋白作为血清学诊断抗原成分，能够有效改善血清学检测质量，弥补国内外常用Mp感染血清学诊断试剂盒抗原成分与其他微生物及人体组织存在非特异交叉反应成分、误诊率高的缺陷。提高检测的特异性和敏感性。 |
