地区：上海市 宝山区
关键词：广西壮族自治区人民医院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001008
成果描述：
| 课题来源与背景：《抑制Skp2基因表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响》是广西医药卫生科学研究计划项目，2010年元月立项（合同号：Z2010237）。结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（ENKTCL）是EB病毒相关性高度恶性肿瘤，好发于广西。对ENKTCL发病机制尚不清楚，尚无理想治疗方法。技术原理及性能指标：该项目主要应用于判断ENKTCL预后以及探讨治疗ENKTCL的分子靶标。技术原理：利用抗原抗体特异性结合原理，用免疫组织化学方法检测ENKTCL组织Skp2蛋白表达，用同期鼻咽粘膜慢性炎作对照，统计ENKTCL组织Skp2表达与临床病理参数及预后的关系；培养ENKTCL细胞株HANK1细胞，构建Skp2-shRNA表达载体，用RNA干扰（RNA interference，RNAi）方法抑制HANK1细胞Skp2基因表达，实时定量RT-PCR和Western blot检测Skp2基因表达，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。旨在寻找好的预测ENKTCL预后的分子标志物及有助于治疗ENKTCL的分子靶标。研究结果：48例鼻咽粘膜慢性炎组织Skp2均为阴性，48例ENKTCL中，71%（34/48）表达Skp2，Skp2表达组与阴性组两年生存率分别为27.4%和75.2%，两者比较，差异有显著性意义（p＜0.01），多因素生存分析发现Skp2蛋白表达是影响ENKTCL预后的独立因素。Skp2-shRNA表达载体明显抑制HANK1细胞Skp2基因表达，Skp2 mRNA表达下调69%，蛋白表达下调65%；细胞增殖受抑，24h和48h抑制率分别为（46.44±4.88）%和（55.27±3.67）%；细胞周期G1期停滞，凋亡细胞增多。结论：Skp2是判断ENKTCL预后分子标记物，抑制Skp2表达可能是治疗ENKTCL的好方法。该项目创新性、先进性：研究以Skp2为靶点治疗ENKTCL的潜在应用价值除该研究外中英文献尚无相关报道。技术成熟程度、适用范围和安全性：该技术根据ENKTCL瘤组织Skp2表达情况预测其预后，属体外检测，对人体无害，对周围环境无害。推广应用情况：研究成果已在区内外部分地区推广应用。在国内专业杂志发表论文7篇。 |
