地区：上海市 宝山区
关键词：广西医科大学
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000005802
成果描述：
| 该课题组在国家自然科学基金的资助下，通过体外-体内实验，应用细胞和分子生物学、分子免疫学等方法，从细胞实验、动物实验和临床研究等三个不同角度，探讨了Cdx2基因在胃癌进展中的作用。通过对人胃癌组织中Cdx2 mRNA表达分析，发现Cdx2基因在成人正常胃组织中不表达，而在胃癌组织和癌旁组织中表达增加，且其表达情况与各类临床病理特征之间具有相关性。通过构建Cdx2过表达的真核表达载体，建立稳定表达Cdx2基因的细胞株，发现Cdx2基因过表达抑制胃癌细胞的生长及增殖，诱导胃癌细胞的凋亡，使细胞周期停滞于G0/G1期，降低胃癌细胞的侵袭、迁移能力，并且引起551条基因表达出现改变；而且，通过对裸鼠人胃癌模型进行瘤体内注射自行构建的稳定高表达Cdx2基因的逆转录病毒颗粒，发现Cdx2基因过表达使裸鼠肿瘤组织Cdx2的表达增高、皮下瘤的生长减慢。RNA干扰技术作为一项新的基因沉默技术，具有较强的序列特异性，可以降解特定基因的mRNA。课题组设计合成了Cdx2基因的特异性小分子干扰RNA（siRNA），并构建了Cdx2 siRNA真核表达载体，发现Cdx2 siRNA可降低人胃癌细胞Cdx2的表达，抑制胃癌细胞的生长及增殖，诱导胃癌细胞的凋亡，使细胞周期停滞于G0/G1期附近，减弱胃癌细胞的粘附、侵袭及迁移能力，并且增加PTEN、caspase-3、caspase-9mRNA及蛋白的表达；而且，通过对裸鼠人胃癌模型进行瘤体内注射自行构建的沉默表达Cdx2、E2F-1基因的慢病毒颗粒，发现沉默表达Cdx2、E2F-1基因可使肿瘤组织中Cdx2、E2F-1表达减少、肿瘤生长增殖速度减慢、肿瘤细胞凋亡增加，而且PTEN、caspase-3、caspase-9mRNA及蛋白的表达增加，而NF-κB mRNA及蛋白的表达降低。该课题研究成果具有创新性，主要表现在：在体外条件下发现Cdx2过表达或者干扰表达均可抑制胃癌细胞的生长增殖、侵袭转移，并且促进胃癌细胞的凋亡；初步揭示了Cdx2过表达和干扰表达促进胃癌细胞凋亡的信号传导通路；在体内条件下初步验证了Cdx2过表达和干扰表达对胃癌生长的抑制作用；应用基因表达谱芯片技术发现了Cdx2基因过表达导致的胃癌细胞差异性表达基因。该课题对于Cdx2基因和胃癌进展关系的研究，揭示了Cdx2基因的表达异常（过表达或干扰表达）可抑制胃癌的生长增殖、侵袭转移，特别是Cdx2基因治疗胃癌的体内实验研究，为临床基因治疗胃癌提供了可靠的依据。该课题已经发表学术论文20篇，其中SCI收录4篇，中华系列杂志4篇，其它核心期刊10余篇；该课题培养博士后1人、博士研究生1人、硕士研究生8人。该研究成果获得了国内外同行专家们的高度肯定。 |
