地区：上海市 宝山区
关键词：广西壮族自治区肿瘤防治研究所
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000001937
成果描述：
| 课题来源与背景：研究任务来源于《雌二醇对子宫内膜癌细胞异常增殖影响的传导通路机理的研究》（广西自然基金课题，合同编号：2013GXNSFAA019219）。子宫内膜癌是一种女性生殖系统常见的恶性肿瘤，认为子宫内膜癌的发生可能与无拮抗的雌激素长期作用有关，但雌激素如何调节细胞增殖及信号通路异常的机理尚未清楚。技术原理及性能指标：该研究利用荧光定量PCR、ELISA检测雌二醇、雌激素受体抑制剂、AKT抑制剂分别作用内膜癌细胞后，VEGF、bFGF、IL-8基因mRNA及蛋白的表达；qRT-PCR、WesternBlot技术检测雌二醇作用内膜癌细胞后AKT活化情况，TransAM检测不同浓度雌二醇及其作用不同时间后的NF-κB活性变化；细胞集落形成实验、流式细胞仪检测细胞周期的变化，CFSE法检测细胞增殖能力。分析雌二醇可能经AKT激活NF-κB通路产生VEGF、bFGF因子，促进肿瘤细胞的增殖与迁移能力。RT-PCR及Western blot分别检测VEGF、bFGF、VEGFR抑制剂BIBF1120、FGFR抑剂Ponatinib和特异性MAPK通路阻断剂U0126、PI3K/AKT抑制剂LY294002分别作用内膜癌细胞后，MEK1、ERK1/2、AKT、PI3K mRNA及蛋白的表达；MTT检测细胞增殖，流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期及凋亡，体外穿膜实验检测各组细胞的迁移能力，分析雌二醇通过非基因转录效应产生的VEGF、bFGF可以激活MAPK、PI3K/AKT通路，促进子宫内膜癌的发生、发展。分别对MAPK通路、PI3K/Akt通路重要表达基因沉默(siRNA)，体外实验及动物实验进一步检证，MAPK、PI3K基因低表达可以干扰E2在基因、蛋白水平激活子宫内膜癌细胞产生VEGF、bFGF，可以下调E2对子宫内膜癌细胞增殖的促进作用和凋亡机制作用。利用iTRAQ标记的定量蛋白质组学筛选鉴定雌激素促进内膜癌细胞增殖相关的差异蛋白NCBP1、EIF3B、KS6A1、STMN1、HSBP1等可能是子宫内膜癌的潜在生物标志物，联合检测这些蛋白可能会提高内膜癌诊断的特异性和敏感性。技术的创造性与先进性：雌二醇可能经AKT激活NF-κB通路产生VEGF、bFG因子，促进肿瘤细胞的增殖与迁移能力。雌二醇通过非基因转录效应产生的VEGF、bFGF可以激活MAPK、PI3K/AKT通路，促进子宫内膜癌的发生、发展。MAPK、PI3K基因可能成为子宫内膜癌分子治疗的潜在靶点。社会经济效益，存在的问题：该项目培养硕士研究生3名。发表论文8篇，其中中华核心２篇、科技核心4篇。项目成果已在广西区内10余家医院进行了推广应用。通过该研究的完成及推广应用，在临床上有助于子宫内膜癌的诊断及预测子宫内膜癌黏附转移，指导制定及调整治疗方案，对患者进行个体化治疗，以达到最好的治疗效果，从而提高子宫内膜癌患者的预后，改善患者生活质量，具有较大的社会效益和学术价值。研究卵巢癌的铂类耐药是今后的研究的重点。今后一段时期，将争取更多基金资助进行以下研究工作：扩大病例进行临床研究；进一步探讨雌激素导致子宫内膜癌的分子机制，为子宫内膜癌的治疗提供理论依据。 |
