电场促进骨髓间充质干细胞扩增的蛋白组学分析

地区:上海市 宝山区

关键词:广西医科大学

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000005768

成果描述:

研究电场对骨髓间充质干细胞(Marrow nesenchymalstem cells,MSCs)在细胞增殖分化中蛋白的表达情况。方法:2000Hz直流脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields, PEMFs)和380MHz射频PEMFs干预体外培养的SD大鼠MSCs。基于细胞体外分离培养、细胞鉴定、蛋白提纯并双向电泳、流式细胞术、拉曼光谱分析等实验技术及检测手段,监测实验组和对照组BMSCs培养过程中形态、数量变化;收集光镜电镜下细胞状态数据、流式抗体、细胞raman光谱、蛋白质总量测定、双向电泳和质谱分析等方面的数据,分析PEMFs对MSCs细胞生物学影响。结果:MSCs在经PEMFs照射后,MSCs增殖、分化,总蛋白量及种类、核酸、脂类含量和结构都会发生一系列改变。结论:PEMFs抑制MSCs增殖,促进其凋亡,无明显促进MSCs增殖的作用。通过蛋白质组学的方法,了解电场促进干细胞增殖过程中细胞形态,数量以及超微结构等方面的变化与细胞总蛋白差异表达之间的关系;从分子水平探讨其扩增机制,并筛选出促进细胞增殖相关功能蛋白质的研究国内外未见报道;选择特定频率和场强的电场作为干扰因素,实现MSCS稳定体外扩增,从传代的MSCs中提取细胞总蛋白,进行双向凝胶电泳获得总蛋白表达图谱,经过与常规方法培养的传代MSCs总蛋白表达图谱比较,挖取差异表达蛋白质点,结合基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱技术(MALDI-TOF-MS/MS)以及相关生物学技术实现差异蛋白鉴定;探讨电场促进细胞扩增的机制和研制促进细胞增殖的生物制剂提供依据。
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