激素性股骨头缺血性坏死差异表达蛋白的筛选与鉴定

地区:上海市 宝山区

关键词:广西医科大学

成果类型:其它

成果领域:生物与新医药

成果编号:A2021061000005766

成果描述:

研发内容:“站立行走兔”SANFH模型建立:特制笼饲养幼兔,逐步诱导迫使其站立饮食,身体直立近似人,两条后腿负重行走,参考传统方法,按一定剂量、时间在兔耳缘静脉注射马血清和腹腔注射甲基强的松龙联合诱导股骨头坏死模型;早期SANFH蛋白组学分析:a、提取早期SANFH发生过程不同时间点的骨组织总蛋白,采用基于固相pH梯度等电聚焦的双向凝胶电泳,获取各时间点蛋白表达图谱。b、通过软件分析获得各个组骨组织比较后的差异表达蛋白斑点,运用基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱技术,鉴定各个组重复出现的差异蛋白质斑点。c、应用生物信息技术,对比分析获得差异表达蛋白分子量、肽质谱及氨基酸系列等信息。关键蛋白分子的验证。研究成果:建立高清晰不同时间点SANFH实验组的股骨头蛋白表达双向凝胶电泳图谱,通过与对照组进行比较,筛选出与SANFH发生相关的关键分子、功能蛋白,验证其表达,分析其生物学功能。研究结果将为SANFH高危人群的预防监测及早期诊断提供生物学标志物,为进一步揭示SANFH机制、确定SANFH检测和治疗指标提供理论依据和实验基础。国内外首次采用“站立行走兔”激素性股骨头缺血性坏死模型:兔与人同为哺乳动物,迫使兔站行走,与人的双下肢负重类似,可探索在双下肢负重下激素与股骨头坏死发生之间的关系;首次应用蛋白质组学方法动态SANFH病理变化过程中蛋白质表达的变化,进一步揭示SANFH机制、确定SANFH的早期实验室检测指标新的靶点。
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