地区：上海市 宝山区
关键词：广西壮族自治区林业科学研究院
成果类型：其它
成果领域：生物与新医药
成果编号：A2021061000005760
成果描述：
| 研究背景：假俭草（Eremochloa ophiuroides (Munro.) Hack.），又称百足草、蜈蚣草，为禾本科蜈蚣草属多年生宿根性优良草坪植物，也是蜈蚣草属中唯一可用作草坪草的物种。假俭草除在东南亚有很少量分布外，在中国长江流域及以南地区的丘陵山地、平原以及各类湿地广泛分布，是国外公认的起源于中国的最好的暖季型草坪草，所以称之为“中国草坪草”。该草以耐瘠薄、病虫害少及养护要求低而著称，所以国外又称之为“懒人草”。此外，假俭草有非常好的耐酸性，其耐酸性是禾本科中最强的，可以在江西等强酸性红壤地区生长繁殖，这在草类物种中也非常少见。假俭草可广泛用于庭院草坪、休憩草坪及护坡草坪的建植，特别适合于水土保持和大面积景观建设，是世界三大暖季型草坪草之一。假俭草不仅可以用作草坪草，也是很好的牧草，为牛羊等草食动物喜食。随着全球水资源和能源的日益紧张以及人们环保意识的不断增强，选择质地适中、适应性强及养护要求低的草种已是草坪草品种选育的主要目标，而假俭草非常符合这一发展趋势。因此，在国内外假俭草越来越广泛地应用于草坪生产和环境绿化。总DNA的提取是分子生物学实验的非常关键的一个环节，其质量直接影响分子生物学实验中与DNA有关的后续实验的进行。假俭草是一种富含次生代谢物质的一个物种，传统的DNA提取方法不易提取得到高质量的总DNA。由于次生代谢产物的种类及其复杂，不同物种，同一物种不同季节，不同年龄的叶片之间的次生代谢产物也有较大区别。因此，一种植物的总DNA提取方法往往不能很好的应用于另一种植物总DNA的提取。技术原理及性能指标：技术原理：经液氮研磨的假俭草叶片在65℃CTAB提取液中裂解细胞，再经过氯仿：异戊醇（24:1）萃取，离心分离后转移上清，得到絮状的DNA沉淀，DNA经硅珠吸附，并在较高温度下用低盐溶液洗脱，再利用氯仿：异戊醇（24:1）萃取，沉淀，最后利用70%乙醇洗涤DNA沉淀，即可得到高质量的假俭草DNA样品。性能指标：以该发明提取的假俭草叶片总DNA为例，用紫外分光光度计（HITACHIU-2900）检测其质量和产量。测定DNA在波长260纳米和280纳米的吸光值，并计算得A260/A280比值为1.84±0.02。该发明所提取的DNA，多酚、多糖、色素等杂质较少，DNA纯度高，故该发明适用于假俭草总DNA的提取。技术的创造性与先进性：该发明中的硅珠悬浮液中的硅珠，能有效的吸附出DNA，同时利用漂洗液可以去除叶片中富含的多糖、多酚、色素和蛋白质等次生代谢物质的干扰，得到多糖、多酚和色素等杂质少的高质量假俭草总DNA；该发明能从长期低温（-20℃以下）储存的假俭草叶片和新鲜叶片中提取到高质量的总DNA；该发明适用于基因组测序等方面所需高质量总DNA的提取，能满足分子生物学研究的要求。技术的成熟程度，适用范围和安全性：该技术已完全熟化，可进行产业化推广应用，适宜假俭草总DNA的提取。由于该发明所用药品为常用的安全风险低的药品。因此安全性较高。应用情况及存在的问题：应用情况：2014年广西壮族自治区林业科学研究院对该技术进行自我转化，能大规模提取高质量的假俭草基因组总DNA。存在的问题：希望能有专项资金继续支持，进一步扩大推广该技术。历年获奖情况：无。 |
